灭菌重点介绍—液体篇

在日常实验室的工作中,无论从事哪种实验方向都会与灭菌产生交集。灭菌的样本范围大体包括以下几种:液体(培养基)、固体(实验器材器械)、废弃物(固体废弃物为主)。不同类型的样品需要使用不同的灭菌程序,不同程序之间的灭菌方法也不尽相同,所采用的技术和工艺也有极大差异。本次我们主要来讨论液体样品的灭菌重点。

液体灭菌经常会存在以下几个问题:

1.装载培养基的瓶盖需要保留空隙,不能完全密闭。

2.培养基灭菌后用于培养标的物达不到很好的培养效果。

3.灭菌之后培养基的装载容器破碎、炸裂。

4.培养基降温之后液面下降浓度改变。

以上几个问题都是经常被忽略的技术点:

1.瓶盖保留空隙是为了在降温阶段瓶内的蒸汽可以逸出来进行蒸发冷却。

2.培养基灭菌后达不到好的灭菌效果,主要是因为培养基是液体,液体的比热容大升降温速度较慢,热量需要蒸汽经过容器传导到培养基中。一般灭菌器的温度探头通常固定在腔体内部顶端,当高温蒸汽接触到温度传感器时立即开始计算灭菌时间,但由于液体样品的升温延迟,培养基没有经历一个完整的灭菌循环就开始降温,对培养基的灭菌效果有影响。也有用户会相应增加灭菌的时长,由于没有对样品真实温度的精确把控,随意增加灭菌时间又会让样本长时间保持在高温下使内部营养物质焦糖化,造成实验假阴性。

3.容器破碎、炸裂主要是因为泄压时样品内外部压差变化过快从而导致容器破损。

4.液面下降是因为在冷却时蒸发走全部都是培养基的水分。

以上问题的根本原因主要体现在以下4点:

1.无法探知样品的真实温度。

2.无法探知培养基是否经历了一个完整的灭菌循环,并且达到了有效的灭菌效果。

3.压力下降过快。

4.蒸发导致的液体损失。

Systec高压灭菌器配备了PT-100柔性温度探头,通过放置对比瓶的方法实时探知样品的真实温度,在液体达到121℃之后开始计算灭菌时间,在降温过程中升高压力保证液体全程不沸腾无液体损失。

Systec深耕灭菌领域多年,为您提供优异、安全的灭菌解决方案。